Immunohistochemia

Immunohistochemia (IHC) to technika laboratoryjna stosowana do określania lokalizacji i ilości białek oraz innych cząsteczek w komórkach i tkankach. Metoda ta umożliwia mikroskopową analizę tkanek przy użyciu przeciwciał do wykrywania specyficznych antygenów. Immunohistochemia znajduje szerokie zastosowanie w wielu dziedzinach, takich jak patologia, biologia i badania medyczne.

Kluczowe cechy immunohistochemii:

Specyficzność: Immunohistochemia wykorzystuje przeciwciała zaprojektowane specjalnie do wiązania się do określonych białek, glikoprotein i innych cząsteczek. Pozwala to na wykrywanie specyficznych celów w komórkach i tkankach.

Wizualizacja: Immunohistochemia pozwala na przyłączenie się przeciwciał do cząsteczek docelowych i generowanie specyficznego sygnału. Sygnał ten zazwyczaj wizualizowany jest jako reakcja barwna lub sygnał fluorescencyjny, dzięki czemu lokalizacja cząsteczek docelowych może być zobaczona pod mikroskopem.

Analiza ilościowa: Immunohistochemia może być używana do określenia ilości specyficznych białek lub cząsteczek. Zwykle dokonuje się tego poprzez analizę gęstości lub inne metody pomiarowe.

Proces immunohistochemii:

Przygotowanie tkanek i komórek: Tkanki lub komórki są odpowiednio cięte i umieszczane na szkiełkach mikroskopowych. Skrawki tkanek są zazwyczaj zatopione w parafinie lub zamrażane kriogenicznie.

Odkrywanie antygenów: Sekcje tkankowe mogą być poddane pewnym obróbkom chemicznym, aby uczynić antygeny bardziej dostępnymi. Proces ten pozwala na wiązanie się antygenów z przeciwciałami.

Dodanie przeciwciał: Dodaje się przeciwciała pierwszorzędowe, które rozpoznają specyficzne cząsteczki docelowe w tkance. Przeciwciała te wiążą się z cząsteczkami docelowymi.

Zastosowanie przeciwciał drugorzędowych: Przeciwciała drugorzędowe wiążą się z przeciwciałami pierwszorzędowymi i generują sygnał (np. reakcję barwną lub sygnał fluorescencyjny).

Wizualizacja: Skrawki tkanek są badane pod mikroskopem, aby zobaczyć sygnał. Sygnały barwne lub fluorescencyjne wskazują lokalizację i rozkład cząsteczek docelowych.

Analiza wyników: Uzyskane obrazy i dane są analizowane. Ocena obejmuje ilość i rozkład białek lub innych cząsteczek.

Obszary zastosowań immunohistochemii:

Patologia: W diagnostyce i klasyfikacji nowotworów, określaniu cech guzów i ocenianiu odpowiedzi na leczenie.

Podstawowe badania biologiczne: W biologii komórkowej i molekularnej do badania lokalizacji i interakcji białek w komórkach.

Badania medyczne: Używana w celu zrozumienia mechanizmów chorób i identyfikacji nowych celów terapeutycznych.

Badania sądowe: Stosowana w medycynie sądowej do wykrywania i analizy biocząsteczek w próbkach.

Badania kliniczne: Stosowana do określenia i analizy poziomów ekspresji białek w próbkach klinicznych.

Immunohistochemia jest potężnym narzędziem do wykrywania specyficznych białek i cząsteczek w próbkach biologicznych i odgrywa ważną rolę w wielu zastosowaniach naukowych i medycznych.